细胞冷冻保存，进口细胞程序降温仪，1. 材料：生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO (Sigma D-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020)、0. 4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL15250-061)、血球计数盘与盖玻片、细胞冻存程序仪(也称为程序降温仪。冷冻保存方法：(1)传统方法: 冷存管置于4 ℃10分钟---gt;-20 ℃30分钟---gt;-80 ℃ 16～18小时(或隔夜)---gt;液氮槽vaporphase长期储存。-20 ℃不可超过1小时，以防止胞内冰晶过大，造成细胞大量，亦可跳过此步骤直接放入-80 ℃冰箱中，惟存活率稍微降低一些。(2)程序降温：利用已设定程序的等速细胞冻存程序仪以-1～-3 ℃/分钟之速度由室温降至(-80 ℃以下)-120 ℃，程序胚胎冷冻仪进口，再放在液氮槽vaporphase长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。
生物样品在 降温冷冻过程中，当由液态向固态变化的相变期内会释放一定热量，使其温度回升， 不控制降温速率的冷冻过程将会导致组织细胞。准确地测定生物样品的相变点， 用微机编制降温程序，进口程序降温仪，以便在样品相变时加大液氮输入量，克服相变样品温度的回 升，使细胞安全而迅速地度过相变期，这是提高被冻样品成活率的关键环节。固定在冷冻室内的温度传感器T1， 将冷冻过程中温度变化通过智能温控仪表的RS485通讯协议接口传输给计算机的上位机软件。上位机软件按照用户的编程，计算出当前的目标温度与实测温度的偏差值，进口自动化程序降温仪，用比例、微分、积分算法算出控制量。通过PDI输出电路去控制电磁阀的开关。当电磁阀开通时，液氮喷入冷冻室，风扇使液氮雾化并均匀地在箱内循环。改变电磁阀的开关频率，就控制了箱内的降温速度。
注意事项：1、选择合适的冻存架和样品温度探头；2、冻存管样品探头插入深度至少为样品内二分之一，探头顶端不得接触管壁；3、血袋样品温度探头请压在血袋下方，且确保片状光滑面（无探头线突出来的一面）紧贴血袋；4、样品与模拟样品（放探头样品）放入冻存腔体时，必须是同一温度；5、必须在样品温度与腔体温度都静置到相同的步温度时，才能再次按RUN开始第二步的降温；
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