细胞往往会在温度剧烈变化中。通过使用细胞欣谕程序降温仪,选择合适的冻存液,设定合适的升降温速率,可有效地克服上述不利因素。实践证明,细胞程序降温仪,(经温度补尝后)每分钟1-3℃的冷冻速率可大大提高冻存细胞的存活率。传统的生物样本降温通常采用-80℃低温冰箱进行分步骤冷冻,该方法的不足为:耗时长,合肥程序降温仪,整个降温过程大约需要一天的时间;在降温过程中需要人为多次转移,液氮程序降温仪,给样本的降温带来众多不可控因素,从而导致样本的存活率降低;无法有效地消除结晶过程中释放的潜热,增大了样本的率。
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冷冻保护剂又是什么呢?它主要用于在低温保存生物样品过程中降低细胞的冷损伤。目前,常用的冷冻保护剂主要分为渗透性的低温保护剂和非渗透性的低温保护剂2大类。渗透性的低温保护剂是指在低温保护剂添加到细胞悬浮液后,可以渗透到细胞膜内部的来置换出细胞的水分。渗透性低温保护剂主要有甘油、DMSO、丙二醇、乙二醇等。非渗透性低温保护剂是指不能渗透到细胞膜内部。常见的非渗透性低温保护剂有海藻糖、葡聚糖等。此外近年来,也经常使用抗冻蛋白作为新型的低温保护剂。
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