步骤：(1)冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基，使细胞处于指数生长期。(2)配制冷冻保存溶液(使用前配制)：另取一离心管，加入培养基、，逐滴加入二亚砜 (DMSO)至20%浓度，自动化程序降温仪，即制成双倍的冻存液，置于室温下待用。(3)离心收集培养之细胞，用加的培养基重悬起细胞，取少量细胞悬浮液(约0. 1 ml)计数细胞浓度及冻前存活率。(4)取与细胞悬液等量的冻存液，缓慢逐滴加入细胞悬液，并晃动试管，制成细胞冻存悬液(DMSOzui后浓度为5～10%)，使细胞浓度为1～5×106cells/ ml，混合均匀，分装于已标示完全之冷冻保存管中，1～2 ml/vial，南京程序降温仪，并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后，注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。
编程功能:可编制任意段数的用户程序.计算机按照用户程序控制冷冻过程。用户程序可方便地编制﹑修改﹑存储﹑调出。运行控制功能:随机恒温功能: 可随时进入，随时解除恒温.手控功能: 程控时手控可参与控制.也可完全手控.键控功能: 可随时用键盘修改降温速度.使温控具有极大的灵活性.数据处理功能，每次冷冻的全部数据和有关信息，都能自动形成一个数据文件存储下来;温度数据和速度可按时间间隔列表或显示温度曲线。
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