细胞冷冻保存，1. 材料：生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO (Sigma D-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020)、0. 4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL15250-061)、血球计数盘与盖玻片、细胞冻存程序仪(也称为程序降温仪。冷冻保存方法：(1)传统方法: 冷存管置于4 ℃10分钟---gt;-20 ℃30分钟---gt;-80 ℃ 16～18小时(或隔夜)---gt;液氮槽vaporphase长期储存。-20 ℃不可超过1小时，以防止胞内冰晶过大，程序降温仪器厂家，造成细胞大量，亦可跳过此步骤直接放入-80 ℃冰箱中，全自动程序降温仪，惟存活率稍微降低一些。(2)程序降温：利用已设定程序的等速细胞冻存程序仪以-1～-3 ℃/分钟之速度由室温降至(-80 ℃以下)-120 ℃，再放在液氮槽vaporphase长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。
程序降温仪其主要功能是：可以根据各种被冻存样品不同的需求，选择一种适合的降温速度进行冷冻。从而使被冻样品的复苏成活率得到很大的提升。由于智能程序降温仪的使用很灵活简便，该仪器特别适用于：探索和优化各种被冻样品的冻存方案。上位机软件按照用户的编程，计算出当前的目标温度与实测温度的偏差值，合肥程序降温仪，用比例、微分、积分算法算出控制量。通过PDI输出电路去控制电磁阀的开关。当电磁阀开通时，液氮喷入冷冻室，风扇使液氮雾化并均匀地在箱内循环。改变电磁阀的开关频率，就控制了箱内的降温速度
6、潜热点应该出现在缓慢降温的第二步结束进入快速拉大温差的第三步前期；7、如潜热点位置出现时刻不对，可根据冻存曲线图调整第二步的结束温度点，形成新的优化程序，并进行新样品验证；8、复苏率是检验冻存是否成功的重要标准，有时即使曲线少有异常，但只要复苏效果好，程序降温仪价格，可不关注；9、降温完成后快速转移样品至液氮罐，让其原生质形成玻璃化状态。转移过程中谨防升温幅度过大（近距离转移，或放冻存容器中转移）。
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